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ELISA试剂盒标准曲线的建立

时间:2022-06-22 11:06:43 浏览:50

很多老师第一次接触ELISA实验时,对于ELISA的标准曲线如何更好的建立可能会有疑惑。下面我们为大家提供2种建立标曲的方法。

一、使用:CurveExpert 汉化版 V1.4 软件作图。(软件下载:CurveExpert 汉化版 V1.4.rar

1、下载好软件并解压。

      


2、点击图标进入软件后,将标曲OD值、标曲浓度复制粘贴进软件中。

 

 


3、选择合适的方程建立标曲。可选择 二项式、直线线性、四参数等方式拟合标曲。

     除非标曲做的特别好,误差小、R值高,可以选择直线线性拟合;一般都建议使用二项式拟合。

     下面我们使用二项式拟合。

8.png


4、点击“ 二项式拟合”键,得到下图,可以看到中间的曲线及右侧标曲的R值=0.999

     再点击左侧的“Info”键,得到标曲的公式以及公式的系数。


5、公式:Y=a+bX+cX^2

     X为已知样本的OD值,a、b、c为标曲公式已知的系数,则Y为待求的样本浓度。

     将上图的公式带入excel表格中,将样本OD值带入公式。


6、点击“回车”键,得到公式换算的样本浓度。

     再将鼠标光标移到方框右下角,双击,将剩余的样本浓度自动填充结果,结束计算。


二、使用EXCEL表格“散点图”作图。

      首先选中标曲数据(1);

      点击插入(2);

      建立散点图(3);

      选择图右上角的图表元素(4);

      选择趋势线(5);

     下一级的更多选项(6);

     然后点击画面右侧的多项式或者线性”,这里我们选择多项式”建立标曲(7);

     再点击下方的显示公式显示R平方值(8);

     再建立公式,将样本OD值,带入得到的公式中(9),

     得到换算的样本浓度。

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