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细胞培养基相关知识介绍

时间:2019-05-27 06:17:03 浏览:104
基本知识
1. 液体培养基贮存于4 oC 冰箱,避免光照,实验进行前放在37度水槽中温热。
2. 液体培养基(加血清) 存放期为六个月,期间glutamine 可能会分解,若细胞生长不佳,可以再添加适量glutamine。
配制参数
粉末培养基配制(以1 升为例):
1. 细胞培养基通常须添加10 % 血清,因此粉末培养基之配制体积为900 ml,pH 为 7.2 - 7.4。NaHCO3 为另外添加,若将NaHCO3 粉末直接加入液体培养基中会造成 pH 之误差,或局部过碱。因此粉末培养基及NaHCO3 粉末应分别溶解后才混合,然后用CO2 气体调整pH,而非用强酸(HCl)或强碱(NaOH),因为氯离子对细胞生长可能有影响,且贮存时培养基的pH 易发生改变。
2. 材料:
2.1. 纯水(milli-Q 水或二次至三次蒸馏水,水品质非常重要)
2.2 粉末培养基
2.3 NaHCO3 (Sigma S-4019)
2.4 电磁搅拌器
2.5 无菌血清瓶
2.6. 0.1 或0.2 mm无菌过滤膜
2.7. pH meter
2.8. 真空帮浦
2.9. CO2 气体
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