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如何改进ELISA试剂盒实验中的错误

时间:2019-06-27 03:46:08 浏览:79

  ELISA试剂盒有许多实验操作步骤,新手操作难免出错。其中许多错误是由不充分的细节造成的。有很多方法可以减少这种错误,比如在做实验时少说话,以防止唾液掉进酶的标签中。当然,我们也要学会探索自己的问题,找出原因。那么,我们如何改进ELISA试剂盒实验中的错误呢?

ELISA试剂盒

  1、评价试剂的实用性

  试剂的稳定性对准确度非常重要。在启用ELISA试剂盒之前,应重复检测阴性和阳性对照品和样品,试剂仅在试剂符合要求后才能使用。

  2、操作前仔细阅读ELISA试剂盒说明书

  严格按照说明书要求进行标准化操作。不同批号的试剂不混合。值得改进的是,只有经过反复的试验,如洗盘的数量,才能加以改进。

  3、加样要准确、快速

  样品添加的不准确度和酶制剂用量的不确定度直接影响显色效果。此外,显色深度和A值的确定与显色剂和最终液体的加入量有关,因此样品的装载应谨慎。需要在一定时间内完成采样的实验,如果采样速度慢,会出现误差,试剂会暴露很长时间,特别是当室温过高时,保质期会缩短甚至失效。

  4、检验技术人员应具备实验室操作的基本素质和实践经验。

  检测技术人员能够熟练操作实验仪器仪表,具有一定的总结和分析问题的能力,能及时、妥善地解决ELISA试剂盒实验中出现的意外情况。

  5、洗涤要彻底

  洗版不彻底,酶偶联物的背景颜色为假阳性。此外,清洁剂应该是新鲜的,可以随时使用。旧的洗涤剂会增加背景,也可能出现假阳性。

  6、严控ELISA试剂盒实验反应时间

  ELISA试剂盒反应时间过长,酶被灭活,反应时间过短,酶与血清中的微生物抗原和抗体不能完全结合,产物结构松散不稳定,易清洗,易产生假阴性。

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