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神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)单克隆抗体

时间:2018-11-21 03:46:46 浏览:84
一、GFAP结构特征
人类GFAP基因定位于17号染色体长臂2区1带上,由9个外显子和8个内含子组成;其蛋白质序列中有4个卷曲结构如下图。GFAP主要分布于中枢神经系统的星形胶质细胞中,参与细胞骨架的构成并维持其张力强度。在中枢神经系统中,星形胶质细胞前体-即波形蛋白是中间丝蛋白的主要存在形式。星形胶质细胞的成熟伴随着波状蛋白向GFAP的转化,GFAP被视为星形胶质细胞成熟化的标记物,GFAP的表达水平受发育过程和病理状态的调节。其在软骨细胞、成纤维细胞、肌上皮细胞、淋巴细胞、肝星形细胞也有表达。但外周系统所表达的GFAP不能被中枢神经系统的GFAP单克隆抗体检测出,表明两个来源的GFAP可能在结构上存在差异。
 
GFAP蛋白的线性结构,功能结构和关键的修饰位点
(图片源自:Trends in Neurosciences)
二、GFAP的主要功能
目前认为GFAP的合成是星形胶质细胞分化过程的重要元素,并且与各种中枢神经系统的损伤存在关联。通过测定GFAP基因的转录过程来研究发育中和疾病状态下的中枢神经系统有着重要的意义。此外,GFAP的免疫组化染色有助于癌细胞与良性增生的鉴别,而且在小管癌中对于癌性小管和良性增生性小管的鉴别具有指导意义。
 
三、GFAP的应用
我们生产的GFAP单克隆抗体(CSB-MA009369A0m,100 µg/50 µg)可应用于ELISA、WB、IHC、IF、FC检测。
WB:
 
GFAP
GFAP抗体与大鼠小鼠的脑组织均具有阳性反应,在WB检测中出现单一目的条带(50 Kd)。该抗体对于鼠脑组织具有较强的亲和力,当抗体稀释1000倍(2.7 ug/ml)使用的时候,仍然呈现单一的目的条带。
IHC:
 
GFAP抗体在脑组织和神经胶质瘤组织里表达,定位在细胞质中,呈强阳性。
IF:
 
GFAP抗体在U251、SY5Y、U87神经类细胞的胞质中检测到强发光信号。
FC:
 
GFAP
关于GFAP抗体的流式验证,市场上只有少数几家的公司做了该数据分析(其中较好的一家数据为:实验组的发光强度是同型无关对照组发光强度的10倍)。在流式细胞检测中,抗体在SY5Y细胞中出现强阳性信号,且实验组荧光强度是对照组的荧光强度的30倍,达到目前市场的领先水平。
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