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ELISA试剂盒实验手法

时间:2019-11-30 16:03    浏览:
                                                               ELISA试剂盒实验操手法总结

ELISA试剂盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是 ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等;ELISA试剂盒适用于体外定性检测血清或血浆等样本中的目的蛋白或者其它待测物,自从60-70年代问世以来,得到全世界科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。为了保证ELISA试剂盒实验质量,我们需要掌握一些小技巧以助于实验的成功,那么ELISA试剂盒的操作技巧您知道吗?

 

南京卡米洛生物工程有限公司总结了ELISA试剂盒的17种操作技巧,如若您掌握了这些实验技巧之后,在做ELISA实验中,试验起来会更熟练,大大的降低了实验过程中的风险,ELISA试剂盒实验的入门新手掌握了这些知识后,操作起来都会快的多。

 

ELISA试剂盒17个相关操作技巧如下:

 

1.切记在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

2.合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。

3.在吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。

4.务必做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。

5.样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。

6.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。

7.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶工作液。

8.ELISA试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。

9.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。

10.ELISA试剂盒洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。

11.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

12.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孔中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。

13.对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。

14.用去离子水或双蒸水配制溶液,切勿使用自来水。

15.在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。

16.吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,ELISA试剂盒吸取的量不够准确。

17.吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。

 

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文章分类: 试剂盒技术资料
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